目的：除去溶剂、水分、以及色谱柱制备过程中其他挥发性杂质；促进固定液均匀牢固的分布在担体上。
(1)老化温度的选择应注意：足够高以除去不挥发物质；足够低以延长柱寿命和减少柱流失；温度越低老化时间应越长；不超过色谱柱的最高使用温度。
(2)填充柱比毛细管柱应更经常、更严格的老化。
(3)填充柱老化时间应长些，可过夜；毛细管柱老化只能是轻度的，时间应短些，防止固定液流失。
(4)老化好的色谱柱若不立即投入使用，应将其从柱箱中取出，两端盖上帽子，防止空气、水分或其他杂质的进入。
色谱柱的再生：
1、反相柱的再生。采用以甲醇:水=95:5(V/V)，纯甲醇，二氯甲烷等溶剂作流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱的量为20一30倍色谱柱体积然后再以相反顺序冲洗色谱柱。
2、正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱每步注意平衡溶剂的顺序，不要颠倒每种流动相流经色谱柱的量为20—30倍柱体积，用甲醇冲洗完后，再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。
3、离子交换柱的再生。长时间在高pH值和高离子强度缓冲溶液中使用，将导致色谱柱离子交换能力降低。用稀酸缓冲溶液冲洗，可使阳离子柱再生；反之，用稀碱缓冲溶液冲洗，可使阴离子柱再生。
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