紫外可见分光光度计的工作原理是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其*的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
作为一种精密仪器，紫外可见分光光度计在运行工作过程中由于工作环境，操作方法等种种原因，其技术状况必然会发生某些变化，可能影响设备的性能，甚至诱发设备故障及事故。因此，分析工作者必须了解分光光度计的基本原理和使用说明，并能及时发现和排除这些隐患，对已产生的故障及时维修才能保证仪器设备的正常运行。
在启动
紫外可见分光光度计之前，使用者需要将样品室内存放的防潮剂取出，当设备在进行正常运转时，请勿开启样品室盖，对于比色皿当中的液体，比较理想的占比为总体积的60-80%，切记不要太多，以防液体外泄腐蚀仪器。而在正常检测时，需保证比色皿保持干净，内壁上液滴需要使用专业的纸进行擦拭，千万不能使用手进行直接的擦拭，容易对使用人员的手造成伤害，甚至造成安全事故。
除此之外，在设备使用过程中，严禁把液体溶剂放置于仪器的表层上，如果出现液体外泄的情况，一定要保证进行及时的清洁处理。当检测完毕之后，需要及时将比色皿内的液体处理掉，使用蒸馏水将其清理干净，同时倒置进行晾干处理。后需要将仪器的电源关闭，把防潮剂放入到样品室内，做好防尘处理，等到管理人员同意方可离去。
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